本項目分別構(gòu)建了過量表達ATF1基因(編碼啤酒酵母醇乙酰基轉(zhuǎn)移酶Ⅰ)以及以及IAH1 基因(編碼啤酒酵母酯酶)的啤酒酵母菌株AU2A以及AU2I。ATF1 、IAH1基因的過量表達是以啤酒酵母強啟動子PGK1P啟動,以終止子ADH1來終止。并對構(gòu)建過程以及構(gòu)建的菌株進行了鑒定,構(gòu)建過程準確可靠,構(gòu)建菌株正確。
本該項目獲得的轉(zhuǎn)化菌的生長性能良好,兩株轉(zhuǎn)化菌與對照菌的最高降糖值、發(fā)酵速率、發(fā)酵度基本相似,兩株轉(zhuǎn)化菌均保留了原來菌株的優(yōu)良發(fā)酵性能。轉(zhuǎn)化菌株AU2A以及AU2I斜面?zhèn)鞔?0次基因不發(fā)生丟失,具有良好的穩(wěn)定性。
菌株AU2A以及AU2I釀造的啤酒中酯類濃度與原始出發(fā)菌株相比有較大差別, IAH1基因超表達的菌株AU2I所釀啤酒中乙酸乙酯、乙酸異丁酯、乙酸異戊酯、乙酸苯乙酯等影響啤酒風味的主要酯類的濃度都有很大程度的下降,乙酸異戊酯的量甚至減少了90%以上。ATF1基因超表達的菌株AU2A所釀啤酒中的酯類的濃度均有上升,其中乙酸乙酯、乙酸異戊酯、乙酸苯乙酯的量甚至達到了出發(fā)菌株所釀啤酒的5倍以上。
本項目已于2010年12月通過山東省尊龍凱時 - 人生就是搏!組織的專家鑒定,在利用基因工程技術(shù)改變啤酒風味研究方面達到國內(nèi)領(lǐng)先水平。